联系人：徐云云
电 话：021-61998551
手 机：15221858802
地 址：上海市松江区卖新公路2077号（新九广场）3楼8306室
邮 编：200612
传 真：021-37680378
邮 箱：shxysw01@163.com
手机网站：m.xybio-sh.com
产品分类
点击次数：2000 发布时间：2016/11/7 13:35:33
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。
2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上，瓶口对准酒精灯，且放在距离酒精灯*近的位置，瓶盖置于酒精灯的另一侧。
3. 将培养瓶瓶口在酒精灯上消毒2-3次，旋开后分别再次消毒瓶口和瓶盖2-3次，盖放于酒精灯右侧后将培养瓶内的培养液悬空倒进污缸，在酒精灯消毒2-3次瓶口，竖直放好。取1ml移液器快速移动在酒精灯上消毒1-2次，然后再装上枪头吸取1.5ml胰酶液，悬空移入培养瓶内。
4. 将培养使胰酶浸没整个瓶壁的细胞层，计时约40s，立马竖起对着灯光可观察到细胞与细胞之间有针孔样缝隙，并有1-2个细胞脱落，这时为胰酶消化的*适时机。若看到成片的细胞从瓶壁脱落为胰酶消化过度；若看不到针孔样缝隙和细胞脱落，则需继续消化，轻轻的迅速平放培养瓶使胰酶浸没细胞层1s后迅速竖起对着灯光观察细胞情况，可反复几次，直至出现针孔样缝隙和1-2个细胞脱落的*佳消化状态。用移液器将胰酶吸净。
5. 吸取1ml细胞冻存液于培养瓶内，并用移液器吸取少量的培养基轻柔的反复冲洗培养瓶壁5-8次，使贴壁细胞完全脱落于培养基内再轻轻吹打2-3次，使细胞尽可能处于单个悬浮状态。
6. 将1ml含有细胞的冻存液移入新的保种管内，拧紧瓶盖，做好实验标记。
7. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧，熄灭酒精灯，整理实验台面，取出实验试剂及污缸等，关闭超净工作台。
8. 将保种管先放于4℃冰箱 30min后拿出放置-20℃冰箱过夜，次日再放于-80℃的冰箱内3-4天，*后存放于-196℃的液氮灌内长期保存。
注此过程也可简化因实际操作过程中经验所得：步骤7结束后将保种管用干脱脂棉包裹后胶带封好直接放于-80℃冰箱内4-5天，即可放于液氮灌保存。但-80℃冰箱也可保存细胞株2-3月。
原创作者：上海信裕生物科技有限公司
首 页| 公司介绍| 产品展示| 公司新闻| 荣誉证书| 诚聘英才| 资料下载| 技术文章| 联系我们| 客户留言
联系人：徐云云 联系电话：021-61998551 ICP备案号：沪ICP备13033103号-9
总访问量：12453680 管理登录
友情链接进口检测试剂盒ELISA试剂盒品牌上海信裕生物科技有限公司试剂盒价格检测试剂盒ELISA试剂盒厂商抗体价格阿仪网
扫一扫，关注我们
销售三