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ELISA试剂盒抗原修复应注意的问题

点击次数：952 发布时间：2017/9/5 19:41:52

elisa试剂盒抗原修复应注意的问题

ELISA试剂盒操作中还应留意如下疑问：
1、热处理后应留意天然冷却。
2、热处理时要防止切片枯燥。
3、应根据不一样的抗体挑选适宜的抗原修正办法。
4、同一批抗原的检测所用温度和时刻确保一致。
5、留意形态学构造的改动（通常经高温修正后胞浆会显着被损坏，对细胞核的影响较大，会呈现核决裂与苏木到淡染等景象；而经酶水解的切片，其细胞浆损坏视消化时刻长短而异，但核损坏较轻）。6、如果在常用的缓冲液中无法完成抗原修正，或经修正后的抗原定位发生改动，可改用一些不常用的缓冲液，或加一些螯合剂，如EDTA等可改善某些抗原的修正。
用于ELISA试剂盒免疫酶安排化学抗原修正的消化酶许多，所选酶的品种、运用的浓度、pH、消化时刻及温度等均要视安排固定的不一样，所检测抗原的性质与安排类型的不一样而异，应经过预试验探索断定。运用酶消化的原则：胰蛋白酶和蛋白酶K通常用于细胞内抗原，如Keratin,CEA与GFAP等。胃蛋白酶则首要用于细胞间质抗原的检测。如fibronectin,Laminin与各型胶原等。通常来说，消化时刻和安排切片固定的长短呈正比。在用酶消化与热修正后均不能获得成果的前提下运用抗原修正与酶消化联系的办法，有时会取得较为满足的成果。通常常用蛋白酶K和微波相联系，但应留意，无论何种性质的抗原检测均可能会在核内呈现假阳性反应。因此有必要要做对照。