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产品分类
点击次数:1125 发布时间:2017/9/19 19:22:11
产品及特点 | 内毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli细胞壁的主要成分,传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来,然后再用各种方法去除其中的内毒素,操作繁琐,DNA回收率低。本产品可以直接把E.coli表面的内毒素去除,从根本上避免了内毒素对后续操作(如质粒DNA提取,重组蛋白质提取)的污染。本产品具有下列特点: 1. 首个在菌体收集阶段去除内毒素的产品,从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆蛋白的接触,从根本上防止了可能产生的污染。 2. 操作简单快速,用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素,只需要10分钟左右时间,不需要复杂仪器设备。 3. 高效,能去除99%以上的内毒素。 4. 跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容,DNA丢失率只有10%左右(其他方法DNA丢失率可以高达50%)。 5. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性,处理过的质粒DNA可用于转染实验。 6. 既可小规模使用(在1.5 mL离心管内),也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。 | ||||||||||||||||||||||||||
规格及成分 |
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运输及保存 | 常温运输和保存,有效期一年。 | ||||||||||||||||||||||||||
自备试剂 | 无 | ||||||||||||||||||||||||||
使用方法 | 一:用于菌液小于3 mL的样品 1. 收集1.5-3 mL E.coli饱和菌液,12,000 rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。 2. 加入1 mL本产品温和混匀后10,000-12,000 rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。 3. 再重复上述操作3-4次,得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA提取或无内毒素蛋白质提取程序。 二:用于菌液多于3 mL的样品 整个操作同上,只是在15或50 mL 塑料离心管中进行,离心速度不能超过离心管的承受力,本产品的用量按比例增加。 | ||||||||||||||||||||||||||
常见问题 | Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素? A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同,所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附,离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子),能够形成大小不等的聚合物,跟质粒DNA和蛋白质大小接近,所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。 | ||||||||||||||||||||||||||
关联产品 | 固相内毒素清除剂(CAT#:60608) | ||||||||||||||||||||||||||
背景资料 |
内毒素的分子结构
外毒素vs.内毒素
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