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产品分类
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
产品货号:S6009M
产品规格:100 mL
产品内容:
储存条件:4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。
产品介绍:
Super ECL Plus 免疫印迹底物是增强型化学发光(ECL) 过氧化物酶的底物,可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现 低表达或高价值蛋白的检测。 Super ECL Plus 底物可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶 联物的免疫印迹实验提供明亮的信号,对低表达或高价值蛋 白检测灵敏度很高。该 ECL 底物能够兼容各种膜、封闭液 和宽范围抗体稀释液,以出色性能、通用性和高性价比,满 足用户的免疫印迹应用需求。 Super ECL Plus(超敏)特点: 1. 具有高灵敏度:检测硝化纤维素膜或 PVDF 膜上低表 达或高价值的蛋白条带; 2. 长信号持续时间:条件优化的情况下,经底物孵育的印 迹条带能够持续输出 6 至 8 h 的可检测光信号; 3. 价格经济:配方经过优化,适用于浓度低的抗体检测。 • 0.2-1 μg/mL 一抗(或 1 mg/mL 的稀释 1:1,000-1:5,000) • 10-50 ng/mL 二抗(或 1 mg/mL 的稀释 1:20,000-1:100,000)
使用方法:
1. 执行常规 SDS-PAGE 电泳、转膜和 Western Blot 步骤,1.0-0.2 μg/mL 一抗室温孵育 1 h 或 4℃过夜,洗膜后,10-50 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。 2. Western Blot 后一次洗膜时,新鲜配制发光工作液:分 别取等体积的溶液 A 和 B,混匀。 注:建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵 敏度略有降低。 3. 成像仪检测:用镊子取出 PVDF 膜置于成像仪检测板上, 含蛋白面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液 (0.125 mL 发光工作液/cm2 膜)滴加在 PVDF 膜上,使发 光液完全覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,参考仪器说明 书进行检测。 4. 压片检测:用镊子取出 PVDF 膜置于保鲜膜上,含蛋白 面朝上,沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液(0.125 mL 发光工作液/cm2膜)滴加在 PVDF 膜上,使发光液完全 覆盖 PVDF 膜,室温孵育 3-5 min,弃发光工作液,用保鲜 膜包好,将膜固定于片夹内,含蛋白面向上。暗室内压片 1 min,立即显影,根据结果再调整压片时间。或分别压片 0.5、 1、3、5 min,然后一起显影观察结果。
注意事项:
1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作 时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。 2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。 3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育 二抗,然后重新用 ECL 曝光。 4. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。 5. NaN3 会抑制 HRP 活性,回收二抗应避免使用 NaN3,如 必需使用勿超过 0.01%。
常见问题:
更新时间:2024/9/9 12:21:16
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