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产品分类
COLO-320细胞,人结肠腺癌细胞
细胞介绍
该细胞能合成复合胺,肾上腺素。
细胞特性
1) 来源:人结肠癌
2) 形态:上皮细胞样
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
COLO-320细胞,人结肠腺癌细胞培养的质量好坏是细胞相关实验的基石,许多朋友都曾经历过因为细胞污染影响实验进度的郁闷,被老板批评是小事,要是影响到正常毕业就是大事了。怎么分辨细胞污染,是不是细胞污染?是那种细胞污染?细胞污染后如何处理?
预防污染
细胞培养是个细致活儿,一不小心就会造成污染,养成良好无菌操作习惯。个人经验是,进实验室之前洗手,很多实验者都不bother,这是国人研究者的一种极端错误,我告诉大家,你仔细洗手比喷酒精效果还好。的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手,一直到手腕,指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。实验必备白大褂,而且一定要是长袖,袖口扎紧的那种,如果不能的话,把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。是戴上手套后手请避免接触工作台外面,如果不得已接触,那再喷酒精。
COLO-320细胞,人结肠腺癌细胞实验前,超净台/实验间紫外照射30min,细胞培养室有24h的空气消毒装置更好了。操作前70% 酒精擦超净台消毒,酒精擦手,擦培养瓶,擦培养基瓶以及各种瓶子的口,总之,所有进超净台的物品都用酒精擦拭一遍。拿培养瓶和培养液时候尽量托下面 拿,切忌不要拿瓶颈部位。有一点要注意的是,超净台里面的东西一定要尽量少放,东西太多活影响超净台内空气流通及空气除菌。实验过程中尽量避免打闹说笑。
每天观察细胞状态,一旦发现细胞不对劲(比如生长缓慢)立即进行处理。一些刚接触细胞的朋友可能有时拿不准情况,也迫切的希望得到帮助。怎么分辨细胞污染,是不是细胞污染?是那种细胞污染?细胞污染后如何处理?
细胞污染鉴别方法
COLO-320细胞,人结肠腺癌细胞这里告诉您判断污染的方法:如果是细菌污染,应该很快培基就浑浊了。如果是真菌感染,特 别是初期感染,在低倍镜下可以看到小黑点,特别是成团的小黑点,要特别注意。如果无法确定,就换高倍镜,如果是死细胞,高倍镜下就可以分辨,而真菌高倍镜 下仍然是小黑点。有些(比如支原体)污染,镜检是看不到的,但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常,那么请扔掉,同时由于支原体空气传播,请检查自己 的培养液和培养箱是不是污染。白色念珠菌是人体霉菌感染的常见霉菌种类,尽管我们有时感觉不到,但它就在你我的身边甚至身上存在着。霉菌污染多来自空气, 所以做实验时说话聊天,或瓶口敞开时间太长,还有培养箱开关频繁是主要原因,应多找自身原因。培养箱水盘一个星期用酒精或0.2%的新吉灭擦一次,如果有紫外线照射就更好了
一旦细胞污染了,怎么解决呢?当然如果你的细胞仍有富余或者冻存的,我还是建议你把污染 的扔掉,再复苏方便省事。如果不幸没有,就不得不救活细胞了。对于细菌污染(常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌),可以用普通双抗(链霉素和青霉素)处理; 若为霉菌或者真菌污染,加入两性霉素B清洗和培养,COLO-320细胞,人结肠腺癌细胞终浓度一般为2.5μg/ml(在30μg/ml时会有细胞毒性)。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。若为支原体或者黑胶虫污染,因为这个太难处理,处理的代价更大更麻烦,建议直接扔掉算了。以免造成实验室其他污染就得不偿失了。
对于贴壁生长的细胞,相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的细胞。洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米,沉降菌数不得超过1个每培养皿。而国外的标准比我国的还要高一点,要求的数量更少。所以在我们的洁净操作台里,并不是真正一个细菌都没有的,所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。所以处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量!
1)将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。
2)继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。
3)继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。
4)重复步骤3再洗。
5)重复步骤3再洗。
6)加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
7)加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
8)再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。
9)加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。
10)24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗.
11)24h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。
COLO-320细胞,人结肠腺癌细胞很多人有个误区,认为进口血清都是贵,其实不然。GIBCO的NCS,马血清,都比国产的便宜的多,质量好的多。只有FBS才很贵,很多时候国产血清往往是污染源,所以用国产血清要严格监控状态。
以上方法主要是针对贴壁生长的细胞,在操作的过程中,一定要小心操作动作,轻柔缓慢,切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。以上方法操作得当,基本上都能救活你的细胞。这个拯救细胞还是主要针对你就只剩这一瓶细胞无路可退的时候。
人肺癌细胞NCI-H32551214-1 & 22-1& 4-5 &20-21640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人非小细胞肺癌细胞NCI-H3581215-4&34-4&34-5 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肺腺癌细胞NCI-H4411020-2 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人小细胞肺癌细胞NCI-H446106-2&20-5&34-5&35-5 1640+10%FBS+1%P/S 半贴壁贴壁/悬浮,混合
人大细胞肺癌细胞NCI-H460 [H460]96-3&33-2&34-4 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人结肠直肠腺癌细胞NCI-H5081114-2 & 15-2 & 15-4 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮加贴壁
人肺鳞癌细胞NCI-H520814-4 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人非小细胞肺癌细胞NCI-H52421-2 & 3-21640+10%FBS 悬浮
人非小细胞肺癌细胞NCI-H5261219-3 & 21-1&22-5 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
人神经内分泌前列腺癌细胞NCI-H660149-3 & 9-4& 10-11640添加0.005 mg/ml 胰岛素,0.01 mg/ml 转铁蛋白,30nM 亚硒酸钠,10 nM 氢化可的松,10 nM beta-雌二醇 ,2mM L-谷氨酰胺,5% 优质胎牛血清。 悬浮细胞
人大细胞肺癌细胞NCI-H661519-3 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人结肠癌细胞NCI-H716724-1 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮加贴壁
人骨髓瘤细胞NCI-H92987-1 &18-5 1640+10%FBS+1%P/S+50uM 悬浮
小鼠正常肝细胞NCTC146958-1DMEM +10%马血清+1%P/S
小鼠肝上皮细胞NCTC clone 146968-4&9-1DMEM +10%马血清+1%P/S
小鼠脑神经瘤细胞neuro-2a1027-5 & 27-2 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK-921115-5 & 17-2 & 32-1 &9-31640+0.2mM肌醇,0.1mM β-Me,0.02mM叶酸,100U IL-2,马血清12.5%,优质胎牛血清,12.5%。
小鼠胚胎细胞NIH/3T3235-4 & 6-1& 11-1&33-5&35-4 DMEM+15%FBS+1%P/S 小牛血清培养不好
大鼠肺泡巨噬细胞NR83831515-2&6-5F12K+15%FBS+2 mM L-谷氨酰胺 悬浮和贴壁混合
更新时间:2024/3/23 17:26:47
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