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22RV1细胞,人前列腺癌细胞

22RV1细胞,人前列腺癌细胞

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原产地:中国大陆发布时间:2016/8/30 13:50:33

22RV1细胞,人前列腺癌细胞首先每一种细胞的消化时间都不同,甚至不是同一次的原代消化时间可能也有差异,次消化时要注意,时间可以尽量短些,第二,不能只看镜下的状态,有时镜下还没有松动,但其实在你弃去胰酶的时候的冲涮作用足以把细胞冲掉。所以时间还是要短,22RV1细胞,人前列腺癌细胞第三,在一定时间消化完后,要用吸管吸去胰酶,不要直接倒掉胰酶,这样液体的冲涮作用足以把细胞冲掉!

采购度:152

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详细内容

22RV1细胞,人前列腺癌细胞

 细胞介绍
22RV1是来自异种移植(在阉割引起前列腺癌衰退又在其父亲的雄性激素信赖型CWR22嫁接后复发的小鼠中连续传代)的人前列腺癌上皮细胞系。此细胞系表达前列腺特异抗原。二羟基睾丸脂酮轻微刺激细胞生长,经western blot检测溶解产物与抗雄性激素受体抗体起免疫反应。EGF刺激细胞生长,但TGFβ-1不能抑制细胞生长。该细胞在裸鼠中成瘤。

细胞特性
1) 来源:前列腺癌
2) 形态:上皮细胞样
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途:仅供科研使用。

22RV1细胞,人前列腺癌细胞培养的质量好坏是细胞相关实验的基石,许多朋友都曾经历过因为细胞污染影响实验进度的郁闷,被老板批评是小事,要是影响到正常毕业就是大事了。怎么分辨细胞污染,是不是细胞污染?是那种细胞污染?细胞污染后如何处理?

预防污染

细胞培养是个细致活儿,一不小心就会造成污染,养成良好无菌操作习惯。个人经验是,进实验室之前洗手,很多实验者都不bother,这是国人研究者的一种极端错误,我告诉大家,你仔细洗手比喷酒精效果还好。的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手,一直到手腕,指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。实验必备白大褂,而且一定要是长袖,袖口扎紧的那种,如果不能的话,把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。是戴上手套后手请避免接触工作台外面,如果不得已接触,那再喷酒精。

22RV1细胞,人前列腺癌细胞实验前,超净台/实验间紫外照射30min,细胞培养室有24h的空气消毒装置更好了。操作前70 酒精擦超净台消毒,酒精擦手,擦培养瓶,擦培养基瓶以及各种瓶子的口,总之,所有进超净台的物品都用酒精擦拭一遍。拿培养瓶和培养液时候尽量托下面 拿,切忌不要拿瓶颈部位。有一点要注意的是,超净台里面的东西一定要尽量少放,东西太多活影响超净台内空气流通及空气除菌。实验过程中尽量避免打闹说笑。

每天观察细胞状态,一旦发现细胞不对劲(比如生长缓慢)立即进行处理。一些刚接触细胞的朋友可能有时拿不准情况,也迫切的希望得到帮助。怎么分辨细胞污染,是不是细胞污染?是那种细胞污染?细胞污染后如何处理?

细胞污染鉴别方法

22RV1细胞,人前列腺癌细胞这里告诉您判断污染的方法:如果是细菌污染,应该很快培基就浑浊了。如果是真菌感染,特 别是初期感染,在低倍镜下可以看到小黑点,特别是成团的小黑点,要特别注意。如果无法确定,就换高倍镜,如果是死细胞,高倍镜下就可以分辨,而真菌高倍镜 下仍然是小黑点。有些(比如支原体)污染,镜检是看不到的,但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常,那么请扔掉,同时由于支原体空气传播,请检查自己 的培养液和培养箱是不是污染。白色念珠菌是人体霉菌感染的常见霉菌种类,尽管我们有时感觉不到,但它就在你我的身边甚至身上存在着。霉菌污染多来自空气, 所以做实验时说话聊天,或瓶口敞开时间太长,还有培养箱开关频繁是主要原因,应多找自身原因。培养箱水盘一个星期用酒精或0.2%的新吉灭擦一次,如果有紫外线照射就更好了

一旦细胞污染了,怎么解决呢?

一旦细胞污染了,怎么解决呢?当然如果你的细胞仍有富余或者冻存的,我还是建议你把污染 的扔掉,再复苏方便省事。如果不幸没有,就不得不救活细胞了。对于细菌污染(常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌),可以用普通双抗(链霉素和青霉素)处理; 若为霉菌或者真菌污染,加入两性霉素B清洗和培养,22RV1细胞,人前列腺癌细胞终浓度一般为2.5μg/ml(在30μg/ml时会有细胞毒性)。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。若为支原体或者黑胶虫污染,因为这个太难处理,处理的代价更大更麻烦,建议直接扔掉算了。以免造成实验室其他污染就得不偿失了。

对于贴壁生长的细胞,相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的细胞。洁净区,并不是没有细菌,而是细菌的数量非常少,国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米,沉降菌数不得超过1个每培养皿。而国外的标准比我国的还要高一点,要求的数量更少。所以在我们的洁净操作台里,并不是真正一个细菌都没有的,所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。所以处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量!

1)将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。

2)继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。

3)继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。

4)重复步骤3再洗。

5)重复步骤3再洗。

6)加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。

7)加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。

8)再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。

9)加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。

1024h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗.

1124h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。

22RV1细胞,人前列腺癌细胞很多人有个误区,认为进口血清都是贵,其实不然。GIBCONCS,马血清,都比国产的便宜的多,质量好的多。只有FBS才很贵,很多时候国产血清往往是污染源,所以用国产血清要严格监控状态。

以上方法主要是针对贴壁生长的细胞,在操作的过程中,一定要小心操作动作,轻柔缓慢,切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。以上方法操作得当,基本上都能救活你的细胞。这个拯救细胞还是主要针对你就只剩这一瓶细胞无路可退的时候。

 人乳腺导管癌细胞T47D264-3 & 4-41640+0.2U/ml胰岛素+10%FBS

小鼠肺上皮细胞TC-1424-2 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁

人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1515-5DMEM+10%FBS  贴壁

神经外胚层肿瘤细胞TC-71629-1 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁

人尤文氏肉瘤细胞TC-32310-1?DMEM +10%FBS

人胶质母细胞瘤T98G 722-3&35-3MEM+10%FBS 贴壁

人舌鳞癌细胞Tca-811386-2 1640+20%FBS+1%P/S 贴壁

人食管癌细胞TE-145-2 & 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁

人食管癌细胞TE-5528-2 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁

人红白血病细胞TF-1929-4 & 29-5 & 15-5 1640 + 10%FBS+2 ng/ml GM-CSF  悬浮

人单核白血病细胞THP-1102-1 & 13-1&33-4 1640+10%FBS+1%P/S+0.05 mMβ-巯基乙醇  悬浮

人单核白血病细胞THP-11135-3&35-21640+10%FBS+1%P/S+0.05 mMβ-巯基乙醇  悬浮 有STR鉴定是HL60

人喉癌细胞TU2121012-2 & 18-1 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁

人喉癌细胞TU686711-4 1640+10%小牛血清+1%P/S  贴壁

小鼠睾丸间质细胞TM3919-2DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清 贴壁

正常小鼠睾丸Sertoli细胞TM4142-2 & 6-2 & 18-1 DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清 贴壁

人甲状腺癌细胞TT831-4F-12K+10%FBS+1%P/S 贴壁

小鼠子宫颈癌细胞U1467-4?DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁

人成骨肉瘤细胞U20S526-4 & 16-5MACOY'S 5A+10%FBS+1%P/S 贴壁

人类星形胶质细胞瘤细胞U251294-4 & 5-1 & 23-3 & 26-5?DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁

人脑星形胶质母细胞瘤U-118MG1229-2 & 29-3?DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁

人脑星形胶质母细胞瘤U-87 MG415-1MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人淋巴瘤细胞U-937 524-5 1640+10%FBS+1%P/S  悬浮

更新时间:2024/3/23 17:26:47

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