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产品分类

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞

价格： 型号：

原产地：中国大陆发布时间：2016/8/30 13:51:29

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞首先每一种细胞的消化时间都不同，甚至不是同一次的原代消化时间可能也有差异，次消化时要注意，时间可以尽量短些，第二，不能只看镜下的状态，有时镜下还没有松动，但其实在你弃去胰酶的时候的冲涮作用足以把细胞冲掉。所以时间还是要短，LNCAP细胞,人前列腺癌细胞第三，在一定时间消化完后，要用吸管吸去胰酶，不要直接倒掉胰酶，这样液体的冲涮作用足以把细胞冲掉！

采购度：155

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标签：(LNCAP细胞 人前列腺癌细胞 人前列腺癌细胞 LNCAP细胞)

详细内容

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞

细胞介绍
人前列腺癌细胞LNCaP克隆FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。这株细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。这株细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。它们仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。生长很慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后，多数细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时，以使细胞再贴壁。此后可以换上新鲜培养液。如果需要，培养瓶内容物可以收集，300g离心15分钟，以10毫升培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。请使用Corning的Cellbind培养瓶培养。

细胞特性
1）来源：前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶
2）形态：上皮细胞样
3）含量：>1x106 个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T75瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供科研使用。

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞培养的质量好坏是细胞相关实验的基石，许多朋友都曾经历过因为细胞污染影响实验进度的郁闷，被老板批评是小事，要是影响到正常毕业就是大事了。怎么分辨细胞污染，是不是细胞污染？是那种细胞污染？细胞污染后如何处理？

预防污染

细胞培养是个细致活儿，一不小心就会造成污染，养成良好无菌操作习惯。个人经验是，进实验室之前洗手，很多实验者都不bother，这是国人研究者的一种极端错误，我告诉大家，你仔细洗手比喷酒精效果还好。的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。实验必备白大褂，而且一定要是长袖，袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。是戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞实验前，超净台/实验间紫外照射30min，细胞培养室有24h的空气消毒装置更好了。操作前70％酒精擦超净台消毒，酒精擦手，擦培养瓶，擦培养基瓶以及各种瓶子的口，总之，所有进超净台的物品都用酒精擦拭一遍。拿培养瓶和培养液时候尽量托下面拿，切忌不要拿瓶颈部位。有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放，东西太多活影响超净台内空气流通及空气除菌。实验过程中尽量避免打闹说笑。

每天观察细胞状态，一旦发现细胞不对劲（比如生长缓慢）立即进行处理。一些刚接触细胞的朋友可能有时拿不准情况，也迫切的希望得到帮助。怎么分辨细胞污染，是不是细胞污染？是那种细胞污染？细胞污染后如何处理？

细胞污染鉴别方法

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞这里告诉您判断污染的方法：如果是细菌污染，应该很快培基就浑浊了。如果是真菌感染，特别是初期感染，在低倍镜下可以看到小黑点，特别是成团的小黑点，要特别注意。如果无法确定，就换高倍镜，如果是死细胞，高倍镜下就可以分辨，而真菌高倍镜下仍然是小黑点。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己的培养液和培养箱是不是污染。白色念珠菌是人体霉菌感染的常见霉菌种类，尽管我们有时感觉不到，但它就在你我的身边甚至身上存在着。霉菌污染多来自空气，所以做实验时说话聊天，或瓶口敞开时间太长，还有培养箱开关频繁是主要原因，应多找自身原因。培养箱水盘一个星期用酒精或0.2％的新吉灭擦一次，如果有紫外线照射就更好了

一旦细胞污染了，怎么解决呢？

一旦细胞污染了，怎么解决呢？当然如果你的细胞仍有富余或者冻存的，我还是建议你把污染的扔掉，再复苏方便省事。如果不幸没有，就不得不救活细胞了。对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌），可以用普通双抗（链霉素和青霉素）处理；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，LNCAP细胞,人前列腺癌细胞终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。若为支原体或者黑胶虫污染，因为这个太难处理，处理的代价更大更麻烦，建议直接扔掉算了。以免造成实验室其他污染就得不偿失了。

对于贴壁生长的细胞，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的细胞。洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿。而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！

1）将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。

2）继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。

3）继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。

4）重复步骤3再洗。

5）重复步骤3再洗。

6）加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。

7）加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。

8）再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。

9）加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。

10）24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.

11）24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。

LNCAP细胞,人前列腺癌细胞很多人有个误区，认为进口血清都是贵，其实不然。GIBCO的NCS，马血清，都比国产的便宜的多，质量好的多。只有FBS才很贵，很多时候国产血清往往是污染源，所以用国产血清要严格监控状态。

以上方法主要是针对贴壁生长的细胞，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。以上方法操作得当，基本上都能救活你的细胞。这个拯救细胞还是主要针对你就只剩这一瓶细胞无路可退的时候。

人白血病细胞U-937712-1 & 24-2 & 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮

人膀胱移行细胞癌UM-UC-336-4?MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-11614-2 & 31-1DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 39℃培养

人前列腺癌细胞VCaP917-4&8-3DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

非洲绿猴肾细胞VERO 621-4MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

非洲绿猴肾细胞VERO E648-4?MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人胚肺成纤维细胞WI-3861-2 & 1-3（有限细胞系）MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人SV-40转化肺成纤维细胞WI-38VA13321-4MEM+10%FBS 贴壁

人正常肝细胞WRL681030-3MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1819-4DMEM+5%FBS+1%P/S 贴壁

人黑素瘤细胞WM266-4419-3MEM+10%FBS 贴壁

人视网膜母细胞Y790 1640+20%FBS+1%P/S 悬浮

小鼠淋巴瘤细胞YAC-138-3 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮

人体肝癌细胞YY8103430-2DMEM+10%FBS 贴壁

SOX1-GFP6原代6-5

小鼠食管粘膜成纤维细胞3原代3-2

小鼠胃粘膜成纤维细胞2原代3-2

小鼠子宫上皮细胞2原代3-1

小鼠子宫成纤维细胞4原代3-1

小鼠心肌细胞1原代3-1

小鼠心肌成纤维细胞2原代3-1

更新时间：2024/3/23 17:26:47

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