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人主动脉内皮细胞传代培养
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
人主动脉内皮细胞建立和培养简介:
创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。
人主动脉内皮细胞主要服务:
1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
2)细胞增殖及冷冻保存
3)基础培养技术实习
4)新药及实验仪器上市前评估
人主动脉内皮细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?
原 因:
黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基
1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;
2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能
a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随人主动脉内皮细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。
b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。
c、是核糖体,也可能是杂质
人舌鳞癌细胞SCC-9139-3 & 15-3 &16-1&3-1 D/F12+10%FBS+0.4ug/ml 贴壁
小鼠杂交瘤SDOW-17729-2 & 29-4 DMEM+10%FBS+1%P/S 悬浮
SFM (BHS)834-5 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
人胃腺癌细胞SGC-79015 16-4 & 25-3 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胶质瘤细胞SHG-4458-4 & 26-3 & 26-4 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y7 28-2MEM 45%;F-12 45%;优质胎牛血清,10%。
人骨肉瘤细胞SJSA-1634-4&35-3 DMEM+10%FBS+1%P/S
人乳腺癌细胞SK-BR-361-4 & 10-3 DMEM+10%FBS+1%P/S
人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-211-3MEM+10%FBS 贴壁
人肺鳞癌细胞SK-MES-1917-1 & 27-1 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人神经上皮瘤细胞SK-N-MC78-3 & 14-3 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人神经母细胞瘤SK-N-SH54-5 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人卵巢癌细胞SK-OV-3413-4Mccoy`s 5A +10%FBS 贴壁
人肝癌细胞SMMC-7721713-4 & 25-2 & 27-3 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胶质瘤细胞SNB-191528-1 & 29-4& 13-51640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胃癌细胞SNU216924-5 & 25-21640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞SNU387622-11640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人肝癌细胞SNU4491010-1 1640+10%热灭活FBS+1%P/S
小鼠胚胎干细胞SOX1-GFP63-1
小鼠骨髓瘤细胞Sp2/04 18-2 1640+10%FBS+1%P/S 圆形贴壁,传代时不可吹打!!!使其自然脱落
更新时间:2024/3/23 17:26:47
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