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大鼠骨骼肌细胞传代培养
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
大鼠骨骼肌细胞建立和培养简介:
创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。
大鼠骨骼肌细胞主要服务:
1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
2)细胞增殖及冷冻保存
3)基础培养技术实习
4)新药及实验仪器上市前评估
大鼠骨骼肌细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?
原 因:
黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基
1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;
2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能
a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随大鼠骨骼肌细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。
b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。
c、是核糖体,也可能是杂质
2321FM-acf 成纤维细胞培养基Fibroblast Medium-animal component free500 ml
5821STEMium-ACF人类多能干细胞培养基-无动物组分 STEMium? Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium-animal component free 500ml
7521MSCM-acf间充质干细胞培养基Mesenchymal Stem Cell Medium-animal component free 500 ml
Classical Media
09011MEMMEMMEM with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml
09021MEM MEM MEM with Hank's Salts and L-Glutamine500 ml
09031MEM MEM MEM with Eagles's Salts and Glutamine 500 ml
09111M199E M199E Medium 199 with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml
09121M199H M199H Medium 199 with Hanks Salts and L-Glutamine 500 ml
09211 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml
09221 DMEMDMEMDMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate500 ml
09221-1LDMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 1L
09231 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES500 ml
09241 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES500 ml
09251 -1L DMEM-prfDMEM-prfDMEM with High Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate - phenol red-free1L
09311 Ham's F-10Ham's F-10F-10 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
09321 Ham's F-12Ham's F-12F-12 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
09411 DMEM/F-12DMEM/F-12DMEM/F-12 with L-Glutamine 500 ml
09421 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine and 15 mM HEPES 500 ml
09511 RPMI 1640RPMI 1640RPMI 1640 without L-Glutamine - with 25 mM HEPES 500 ml
更新时间:2024/3/23 17:27:02
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