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大鼠表皮干细胞传代培养
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
大鼠表皮干细胞建立和培养简介:
创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。
大鼠表皮干细胞主要服务:
1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
2)细胞增殖及冷冻保存
3)基础培养技术实习
4)新药及实验仪器上市前评估
大鼠表皮干细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?
原 因:
黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基
1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;
2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能
a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随大鼠表皮干细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。
b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。
c、是核糖体,也可能是杂质
4852NPCGS 髓核细胞生长因子Nucleus Pulposus Cell Growth Supplement5 ml
5252HGS 肝细胞生长因子Hepatocyte Growth Supplement5 ml
5352SteCGS 星形细胞生长因子Stellate Cell Growth Supplement5 ml
5852StemGS 人胚胎干细胞生长因子 50X StemGS? Human Embryonic Stem Cell Growth Supplement 50X 10 ml
5862StemGS-XF 无异种多功能干细胞生长因子 50X Xenofree Human Pluripotent Stem Cell Growth Supplement 50X10 ml
5962CSGS心肌细胞选择性培养基生长因子Cardiomyocyte Selective Medium Growth Supplement10 ml
5972CPMS心肌细胞平面培养基生长因子Cardiomyocyte Plating Medium Supplement1ml
6252CMGS心肌细胞生长因子Cardiac Myocyte Growth Supplement5 ml
6552CEpiCGS 角膜上皮细胞生长因子Corneal Epithelial Cell Growth Supplement5 ml
6592TMCGS小梁网细胞生长因子Trabecular Meshwork Cells Growth Supplement5 ml
7152TGS滋养层细胞生长因子 Trophoblast Growth Supplement5 ml
7232PAdDS前脂肪细胞分化生长因子Preadipocyte Differentiation Supplement
7252PAGS前脂肪细胞生长因子 Preadipocyte Growth Supplement5 ml
7262AdGS脂肪细胞生长因子Adipocyte Growth Supplement5 ml
7352OEpiCGS卵巢上皮细胞生长因子Ovarian Epithelial Cell Growth Supplement5 ml
7532MODS间充质干细胞成骨分化生长因子Mesenchymal Stem Cell Osteogenic Differentiation supplement5 ml
7542MADS间充质干细胞脂肪分化生长因子Mesenchymal Stem Cell Adipogenic Differentiation supplement5 ml
7552MSCGS间充质干细胞生长因子Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement5 ml
7562MSCGS-sf间充质干细胞生长因子Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement-serum free5 ml
7572MSCGS-acf间充质干细胞生长因子-无动物组分Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement-animal component free5 ml
更新时间:2024/3/23 17:27:02
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