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大鼠脊髓神经元传代培养
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
大鼠脊髓神经元建立和培养简介:
创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。
大鼠脊髓神经元主要服务:
1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
2)细胞增殖及冷冻保存
3)基础培养技术实习
4)新药及实验仪器上市前评估
大鼠脊髓神经元培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?
原 因:
黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基
1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;
2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能
a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随大鼠脊髓神经元传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。
b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。
c、是核糖体,也可能是杂质
破骨细胞
皮肤肥大细胞
脂肪细胞
前脂肪细胞Preadipocytes
脑动脉血管内皮细胞Cerebral artery endothelialcells
脑动脉血管平滑肌细胞Cerebral artery smooth musclecells
脑静脉血管内皮细胞Cerebral venous endothelialcells
脑静脉血管平滑肌细胞Cerebral venoussmooth musclecells
脑膜细胞Meningeal cells
神经元细胞Neuronscells
神经少突起前质胶质细胞Neural glial cell precursorssmall protrusions
神经星形胶质细胞Neural astrocytes cells
神经小胶质细胞Neural microglia cells
脑微血管内皮细胞Brain microvascular endothelialcells
脑成纤维细胞
小脑颗粒细胞Cerebellar granule cells
眼角膜上皮细胞Corneal epithelial cells
视网膜微血管内皮细胞Retinal microvascularendothelial cells
角膜成纤维细胞Corneal fibroblasts
脉络膜微血管细胞Choroidal cells
牙周膜成纤维细胞Periodontal ligament fibroblasts
人晶状体上皮细胞
人角膜内皮细胞
人视网膜色素上皮细胞
人小梁网细胞
人视网膜muller 细胞
肺微血管内皮细胞Pulmonary microvascularendothelial cells
肺血管平滑肌细胞Pulmonary vascular smooth musclecells
更新时间:2024/3/23 17:27:02
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