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兔脾基质细胞

兔脾基质细胞

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原产地:中国大陆发布时间:2016/9/9 13:38:44

兔脾基质细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

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 兔脾基质细胞传代培养

细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

兔脾基质细胞建立和培养简介:

创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。                        

兔脾基质细胞主要服务:

1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)

2)细胞增殖及冷冻保存

3)基础培养技术实习

4)新药及实验仪器上市前评估

兔脾基质细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?

                                          因:

黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基

1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;

2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能

  a、是黑胶虫,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。黑胶虫可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随兔脾基质细胞传代而传代。黑胶虫与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的黑胶虫,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。

 b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。

 c、是核糖体,也可能是杂质

 小鼠肝上皮细胞NCTC clone 146968-4&9-1DMEM +10%马血清+1%P/S

小鼠脑神经瘤细胞neuro-2a1027-5 & 27-2 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK-921115-5 & 17-2 & 32-1 &9-31640+0.2mM肌醇,0.1mM β-Me,0.02mM叶酸,100U IL-2,马血清12.5%,优质胎牛血清,12.5%。

小鼠胚胎细胞NIH/3T3235-4 & 6-1& 11-1&33-5&35-4 DMEM+15%FBS+1%P/S   小牛血清培养不好

大鼠肺泡巨噬细胞NR83831515-2&6-5F12K+15%FBS+2 mM L-谷氨酰胺 悬浮和贴壁混合

大鼠肾细胞NRK-52E1911-4&33-1&18-5&6-5&9-4 DMEM+5%小牛血清+1%P/S 贴壁(FBS养不好)

绵羊肺成纤维细胞OAR-L1229-1DMEM+10%FBS 贴壁

人低侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1A55-2& 1640+10%FBS+1%P/S

弥漫大B细胞淋巴瘤细胞?OCI-LY10832-3 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮

小鼠骨髓基质细胞OP932-4MEM-a(无核苷)+20%FBS 贴壁

人骨髓瘤细胞OPM286-2&10-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 悬浮

人肾癌细胞OS-RC-2114-1&33-11640+10%FBS 贴壁

人卵巢癌细胞OV-90825-5M199+15%FBS 贴壁

人卵巢腺癌细胞OVCAR-3146-1 & 29-5 & 32-1 1640  + 20% FBS  +0.01毫克/毫升牛胰岛素

小鼠畸胎瘤细胞P1971-4 & 3-3MEMα+小牛血清,7.5+胎牛血清,2.5%。

小鼠白血病细胞P388523-3 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮

人胰腺癌细胞PANC-11030-4 & 16-5 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁

人胰腺癌细胞 PANC05.04523-3 1640+15%FBS+20U/ml 人重组insulin 贴壁

更新时间:2024/3/28 13:48:33

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