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兔脑动脉血管内皮细胞传代培养
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
兔脑动脉血管内皮细胞建立和培养简介:
创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。
兔脑动脉血管内皮细胞主要服务:
1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)
2)细胞增殖及冷冻保存
3)基础培养技术实习
4)新药及实验仪器上市前评估
兔脑动脉血管内皮细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?
原 因:
黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基
1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;
2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能
a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随兔脑动脉血管内皮细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。
b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。
c、是核糖体,也可能是杂质
人单核白血病细胞THP-1102-1 & 13-1&33-4 1640+10%FBS+1%P/S+0.05 mMβ-巯基乙醇 悬浮
人单核白血病细胞THP-11135-3&35-21640+10%FBS+1%P/S+0.05 mMβ-巯基乙醇 悬浮 有STR鉴定是HL60
人喉癌细胞TU2121012-2 & 18-1 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人喉癌细胞TU686711-4 1640+10%小牛血清+1%P/S 贴壁
小鼠睾丸间质细胞TM3919-2DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清 贴壁
正常小鼠睾丸Sertoli细胞TM4142-2 & 6-2 & 18-1 DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清 贴壁
人甲状腺癌细胞TT831-4F-12K+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠子宫颈癌细胞U1467-4?DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁
人成骨肉瘤细胞U20S526-4 & 16-5MACOY'S 5A+10%FBS+1%P/S 贴壁
人类星形胶质细胞瘤细胞U251294-4 & 5-1 & 23-3 & 26-5?DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁
人脑星形胶质母细胞瘤U-118MG1229-2 & 29-3?DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁
人脑星形胶质母细胞瘤U-87 MG415-1MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人淋巴瘤细胞U-937 524-5 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
人白血病细胞U-937712-1 & 24-2 & 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
人膀胱移行细胞癌UM-UC-336-4?MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-11614-2 & 31-1DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 39℃培养
人前列腺癌细胞VCaP917-4&8-3DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
非洲绿猴肾细胞VERO 621-4MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
非洲绿猴肾细胞VERO E648-4?MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人胚肺成纤维细胞WI-3861-2 & 1-3(有限细胞系)MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
更新时间:2024/3/23 17:27:02
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