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产品分类
非酶DNA清除剂-2
数量:大量
保质期:一年
保存条件:4℃保存
规格:15次
用Trizol等方法提取的细胞总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前*常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。天恩泽开发的非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
1. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。
2. 本身不含RNase污染。
3. 快速,全部操作在样品管中完成,只需要十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
6. 可以用于小RNA中DNA污染的清除。
我准备按照你提供的基本程序尝试一次。非酶DNA清除剂-2还需要问的问题是:
1.洗涤包含体,实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀,对吗?我将沉淀-20度保存,应该没有什么影响吧?另外,我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF,是蛋白酶抑制剂,它是否对目的蛋白有影响呢?
2.尿素洗涤包含体,洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE,得到一个收率和纯度*佳的尿素浓度。非酶DNA清除剂-2洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗?但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗?这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗?
3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶,不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲,而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素,对复性有影响吗?
不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我,我再仔细看看。
非酶DNA清除剂-2技术回答:
1)包含体在-20度或-70度保存较好,包含体状态的蛋白稳定性好,一但复性成功,溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF,是蛋白酶抑制剂,应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF,加与不加看你的蛋白的稳定性。
2)洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀,用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬,与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况,非酶DNA清除剂-2选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。
3)用Tris配尿素,OK!
ZM104-2DNA Marker Ⅳ(条带500.1000.1500.3000.5000.8000)500TZOMANBIO
ZM105-1DNA Marker Ⅴ(条带200.400.700.1000.1500.2000)50TZOMANBIO
ZM105-2DNA Marker Ⅴ(条带200.400.700.1000.1500.2000)500TZOMANBIO
ZM106-1DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000)50TZOMANBIO
ZM106-2DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000)500TZOMANBIO
ZM107-1DNA Marker Ⅶ(条带300.500.1000.1500.2000.2500)50TZOMANBIO
ZM107-2DNA Marker Ⅶ(条带300.500.1000.1500.2000.2500)500TZOMANBIO
ladder marker系列
ZM201-150bp DNA Marker(条带50.100.150.200.250.300.250.400)50TZOMANBIO
ZM201-250bp DNA Marker(条带50.100.150.200.250.300.250.400)500TZOMANBIO
ZM202-150bp Plus(条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000)50TZOMANBIO
ZM202-250bp Plus(条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000)500TZOMANBIO
ZM203-1100bp DNA Marker(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500)50TZOMANBIO
ZM203-2100bp DNA Marker(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500)500TZOMANBIO
ZM204-1100bp Plus(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000) 50TZOMANBIO
ZM204-2100bp Plus(100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000) 500TZOMANBIO
ZM205-1200bp(条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000)50TZOMANBIO
ZM205-2200bp(条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000)500TZOMANBIO
ZM206-1250bp(条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000)50TZOMANBIO
ZM206-2250bp(条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000)500TZOMANBIO
更新时间:2024/3/23 17:27:02
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