联系人:徐云云
电 话:021-61998551
手 机:15221858802
地 址:上海市松江区卖新公路2077号(新九广场)3楼8306室
邮 编:200612
传 真:021-37680378
邮 箱:shxysw01@163.com
手机网站:m.xybio-sh.com
产品分类
TRIZOL伴侣
数量:大量
保质期:一年
保存条件:常温
规格:50次
其主要特点是:
1. 跟TRIzol结合使用,把经典操作变成了柱式操作,简化了实验流程,用户可以节约30分钟的时间。
2. RNA质量更好,因为操作简短减少了RNA在提取过程中的降解。
3. RNA纯度更高,OD260/OD280一般在1.9以上,比经典TRIzol法得到的更纯。
4. 专门的洗涤条件能有效去除基因组DNA,进一步减少其对RNA的污染
5. 适用于其他基于酸酚/异硫氰酸胍提取原理的RNA提取产品,包括TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent等。
6. 可以省略处理步骤,避免接触有毒试剂(但效果稍差)。
我准备按照你提供的基本程序尝试一次。TRIZOL伴侣还需要问的问题是:
1.洗涤包含体,实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀,对吗?我将沉淀-20度保存,应该没有什么影响吧?另外,我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF,是蛋白酶抑制剂,它是否对目的蛋白有影响呢?
2.尿素洗涤包含体,洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE,得到一个收率和纯度*佳的尿素浓度。TRIZOL伴侣洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗?但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗?这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗?
3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶,不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲,而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素,对复性有影响吗?
不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我,我再仔细看看。
TRIZOL伴侣技术回答:
1)包含体在-20度或-70度保存较好,包含体状态的蛋白稳定性好,一但复性成功,溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF,是蛋白酶抑制剂,应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF,加与不加看你的蛋白的稳定性。
2)洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀,用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬,与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况,TRIZOL伴侣选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。
3)用Tris配尿素,OK!
100826-10 穿刺培养基 10管
100827-10 菌种保存液 10管
60404-100 超级培养基 100ml
抗菌素
70803-100 单菌落筛选试剂盒 100次
60206-10 氨苄青霉素溶液 10ml
60207-10 氯霉素溶液 10ml
60209A-5 四环素粉末及溶液 5g
60209B-10 四环素粉末及溶液 5ml
100829-1 氨苄青霉素干粉 1g
100830-1 氯霉素干粉 1g
100834-5 硫酸卡那霉素干粉 5g
100834-10 硫酸卡那霉素溶液 10ml
100836-5 硫酸新霉素 5g
100838-100 G418 100mg
100839-250 潮霉素B 250mg
100840-25 嘌呤霉素 25mg
更新时间:2024/4/24 10:22:06
首 页| 公司介绍| 产品展示| 公司新闻| 荣誉证书| 诚聘英才| 资料下载| 技术文章| 联系我们| 客户留言
联系人:徐云云 联系电话:021-61998551 ICP备案号:沪ICP备13033103号-9 总访问量:12452968 管理登录
友情链接进口检测试剂盒ELISA试剂盒品牌上海信裕生物科技有限公司试剂盒价格检测试剂盒ELISA试剂盒厂商抗体价格阿仪网
扫一扫,关注我们