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产品分类
小鼠抗FLAG标签单抗
数量:大量
保质期:两年
保存条件:-20℃保存
规格:100µL
Flag标签是有八个氨基酸(DYKDDDDK)组成的亲水性多肽。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,所以可以用于纯化所有有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。本抗体可以高度特异性识别重组蛋白的C末端或N末端的Flag标签,而不受临近氨基酸组成的影响,它可用于检测各种载体表达的Flag标签蛋白。它具有下列特点:克隆号: 2E4 抗体类型: Mouse IgG1 应 用: WB,IP,IF建议浓度:WB: 1:1000~1:10000 IP: 1:100~1:500IF: 1:200~1:1000
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。小鼠抗FLAG标签单抗传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
小鼠抗FLAG标签单抗除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,小鼠抗FLAG标签单抗比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,小鼠抗FLAG标签单抗倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,小鼠抗FLAG标签单抗但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
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★总DNA/RNA共提取试剂盒
★R6731-00total DNA/RNA Isolation Kit(5)
R6731-01total DNA/RNA Isolation Kit(50)
★R6731-02total DNA/RNA Isolation Kit(200)
★石蜡包埋组织DNA/RNA共提取试剂盒
★R6951-00FFPE DNA/RNA Kit(5)
更新时间:2024/3/23 17:27:15
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