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产品分类
包涵体微量纯化试剂盒
数量:大量
保质期:一年
保存条件:4℃保存(溶菌酶和核酸清除剂需要-20℃保存,包涵体溶解液室温保存)
规格:20次
包涵体(Inclusion Body)是指细菌表达(主要是大肠杆菌)的蛋白在细胞胞浆内(对胞浆蛋白)或膜间内(对分泌蛋白)凝集形成的无活性的固体颗粒。包涵体形成的主要原因是在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白折叠辅助因子,或环境不适导致无法形成正确的蛋白质次级键。由于包涵体主要由重组蛋白质组成,因此分离纯化包涵体是分离纯化具有活性的重组蛋白的步。本产品就是用于快速的提取高质量的包涵体。它具有下列特点:1. 操作简单快速,整个过程只要三十分钟左右。2. 微量纯化,可以在1.5 mL离心管中完成。3. 能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份,使重组蛋白所占比重达到60%以上。4. 细胞裂解通过非离子洗涤剂的化学裂解法,裂解更加温和。5. 得到的包涵体可以用于重折叠。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。包涵体微量纯化试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
包涵体微量纯化试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,包涵体微量纯化试剂盒比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,包涵体微量纯化试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,包涵体微量纯化试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
90315-100 非冻型尿液DNA保存液 100ml
80802A-100 非冻型拭子DNA保存液 100ml
80802B-100 非冻型拭子DNA保存液 100ml
70603-100 土壤腐殖酸清除剂 100ml
70302-100 一步离心式石蜡清除剂 100次
90901-200 菌体内毒素清除剂 200ml
90406-100 血液抗凝剂 100ml
80603A-50 微型离心管专用研磨杵 50只
80603B-50 微型离心管专用研磨杵 50套
动物DNA提取
3670-100 动物DNAout 100ml
3670-250 动物DNAout 250ml
71206-50 柱式动物DNAout 50次
80923-4 大提柱式动物DNAout 4次
更新时间:2024/3/23 17:27:15
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