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产品分类
DTT,免称量蛋白级
数量:大量
保质期:一年
保存条件:-20℃保存
规格:48管
本产品是以干燥、室温稳定、一次性使用的形式提供的分装好的二硫苏糖醇,外包装是铝箔封口的微量管。每个管含有7.7毫克的DTT,仅需加入100微升水或缓冲液即可配制成500mM的溶液。使用这种方便的产品则不需要浪费时间和精力去制备储存液。本产品具有下列特点:1. 节省时间,加入100微升水,吸取所需体积的溶液即可。2. 减少浪费,可以简单地制备一次性用量的(100微升)500mM DTT。3. 储存简单,不需要担心储存液的稳定性和降解;仅需制备当天所需的量即可,将多余的产品仍以稳定、干燥、未开封的状态储存即可。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。DTT,免称量蛋白级传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
DTT,免称量蛋白级除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,DTT,免称量蛋白级比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,DTT,免称量蛋白级倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,DTT,免称量蛋白级但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
D6944-02Plasmid Mini Kit I(200)-S Spin Column
D6944-04Plasmid Mini Kit I(1000)-S Spin Column
质粒小量提取试剂盒 II型 :从小于15ml培养过夜的菌液提取50-70ug高纯度质粒DNA
D6945-00Plasmid Mini Kit II(5)
D6945-01Plasmid Mini Kit II(50)
D6945-02Plasmid Mini Kit II(200)
质粒中量提取试剂盒:从25-50ml细菌培养液中纯化200-250ug高纯度的质粒DNA
D6904-01Plasmid Midi Kit(10)
D6904-03Plasmid Midi Kit(25)
D6904-04Plasmid Midi Kit(100)
质粒大量提取试剂盒:从200-250ml细菌培养液中提取1.5mg质粒DNA
更新时间:2024/3/23 17:27:15
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