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产品分类
价格： 型号：
原产地：中国大陆发布时间：2016/9/20 15:10:46
采购度：250
包涵体蛋白溶解及复性套装
数量：大量
保质期：一年
保存条件：常温保存
规格：100次
用E.coli作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体，其中的重组蛋白质只完成部分折叠，还没形成*后的正确空间结构，所以没有生物活性，要得到有活性的重组蛋白，还需要后续的溶解和复性（重折叠）处理。目前*常用的溶解包涵体的方法是用尿素，Sarkosyl，盐酸胍等强变性剂，其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性，使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计，具有下列特点：1. 一站式，提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。2. 采用温和法溶解包涵体，释放的包涵体蛋白质不彻底变性，还能保持其部分折叠的结构，使后续的复性处理效率提高。3. 所用复性液基于稀释复性，经过精心优化，有利于大部分蛋白的复性。4. 还提供五种不同的添加剂，它们可以单独加入复性液，也可以按一定比例进行自由组合，以适应不同的蛋白质折叠需求。 5. 本试剂盒提供实惠的小规格，用于做预实验用，用户如果选择到合适的溶液组合后，可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。6. 本试剂盒足够100次小规模（1 mL规模）的蛋白质复性实验。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。包涵体蛋白溶解及复性套装传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
包涵体蛋白溶解及复性套装除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，包涵体蛋白溶解及复性套装比例也很高，虽然仍存在风险。
1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，包涵体蛋白溶解及复性套装倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。
2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，包涵体蛋白溶解及复性套装但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。
70702-50 分枝杆菌DNAout 50次
70703-50 柱式分枝杆菌DNAout 50次
60701-30 土壤DNAout 30次
60701-100次 土壤DNAout 100次
71205-50 柱式土壤DNAout 50次
80928-4 大提柱式土壤DNAout 4次
病毒DNA提取
3674-50 一管式病毒DNAout 50次
3674-200 一管式病毒DNAout 200次
70701-50 柱式病毒DNAout 50次
80921-1 96孔板病毒DNAout 1次
80921-5 96孔板病毒DNAout 5次
更新时间：2024/3/23 17:27:15
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