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产品分类
CDNA文库构建试剂盒
数量: 大量
保存条件: Dr. GenTLE Precipitation Carrier 4℃保存,3 M Sodium Acetate(pH5.2) 4℃保存,Spin Column 4℃保存,FALCON Tube 常温保存,E.coli Electro-Cells -80℃保存,SOC 4℃保存,其他组份-20℃保存
规格: 5次
利用真核生物的各种组织或细胞中的Poly(A)+ RNA合成cDNA,然后进行基因克隆,这在分子生物学实验中被广泛应用。这一技术的使用,使基因的结构解析及目的蛋白的表达等变得更为方便。一般合成cDNA以及构建cDNA Library的方法为: ① 合成与目的Poly(A)+ RNA相互补的双链cDNA;② 将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组; ③ 将重组体导入细菌或真核细胞内进行扩增, 构建cDNA Library。构建成的cDNA Library可以用于cDNA的解析,或者进一步进行体外转录或体外翻译等。本试剂盒是以动植物由来的Poly(A)+ RNA为模板合成双链cDNA后,将双链cDNA与Plasmid Vector进行重组,构建质粒cDNA Library的试剂盒。试剂盒中使用的载体pAP3neo含有SV40启动子,可以在哺乳动物细胞内进行表达 具有下列特点:1. 操作简便:使用Ready-to-Use型试剂。2. 高灵敏度:能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。3. 高特异性:抑制完整的染色体DNA的混入,选择性地提取断片化DNA。4. 快速操作:整体操作约需2.5小时。5. 定 量 性: 与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。6. 安 全 性: 不使用苯酚等。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。CDNA文库构建试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
CDNA文库构建试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,CDNA文库构建试剂盒比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,CDNA文库构建试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,CDNA文库构建试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
免疫血清
ZI201-1兔抗人IgG0.5mlZOMANBIO
ZI201-2兔抗人IgA0.5mlZOMANBIO
ZI201-3兔抗人IgM0.5mlZOMANBIO
ZI202-1兔抗人纤维蛋白原0.5mlZOMANBIO
ZI203-1兔抗人血清(多价抗体)0.5mlZOMANBIO
ZI204-1兔抗人IgG-F(ab)20.5mlZOMANBIO
ZI205-1兔抗人白蛋白0.5mlZOMANBIO
ZI206-1兔抗人IgG-FC0.5mlZOMANBIO
ZI207-1兔抗人小鼠IgG0.5mlZOMANBIO
ZI208-1兔抗人小鼠血清0.5mlZOMANBIO
ZI209-1兔抗小鼠IgG-FC0.5mlZOMANBIO
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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