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即用型EMSA试剂盒

即用型EMSA试剂盒

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原产地:中国大陆发布时间:2016/9/23 11:24:44

即用型EMSA试剂盒快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ,重复性好,离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

采购度:174

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详细内容

 即用型EMSA试剂盒

 数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 100次
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay),也称gel shift,是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术*初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通过EMSA可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况,从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。本产品具有下列特点:1. 一站式,使用方便,本试剂盒提供了进行EMSA实验的探针标记、蛋白和DNA 结合以及EMSA上样等的主要试剂,使EMSA实验变得简单方便。2. 非特异性结合低,EMSA结合缓冲液中含有poly(dI-dC)等有效成分,其中 poly(dI-dC)的浓度经过优化,可以很好的消除蛋白和标记探针间的非特异性结 合,同时又不会减弱目的转录因子和标记探针间的结合。3. 本试剂盒足够标记10-20次探针,足够进行100个蛋白和探针的结合反应。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。即用型EMSA试剂盒传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

即用型EMSA试剂盒除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,即用型EMSA试剂盒比例也很高,虽然仍存在风险。

1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,即用型EMSA试剂盒倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。

2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,即用型EMSA试剂盒但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。

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更新时间:2024/3/23 17:27:28

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