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产品分类
价格： 型号：
原产地：中国大陆发布时间：2016/9/26 14:03:58
采购度：241
辣根过氧化物酶，偶联级
数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 100mg
HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白，由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成，中性糖和氨基糖约占18％，主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基，该辅基在403nm波长处有吸收峰，而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比，也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量，并非表示HRP制剂的真正纯度，而且RZ值高的HRP制剂，并不意味着酶活性也高。但可以以纯酶溶液在10mm光径403nm波长下的吸光度来计算酶浓度[1％(W/V)酶溶液吸光度为22.5，浓度为227umol/L]。HRP对热及有机溶剂的作用比较稳定，用甲苯与石蜡切片处理或用纯乙醇或l0％甲醛水溶液固定做冷冻切片，均不能使其活性改变。或硫化物在10–5～10–6mol/L浓度时具有可逆性地抑制HRP的作用；氟化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10-3mol／L浓度时抑制HRP；HRP还可被羟甲基过氧化氢不可逆地抑制。强酸也是HRP的强烈的抑制剂。HRP是迄今为止应用*为广泛的标记用酶，其主要特点是1. 易于提取，价格相对低廉。2. 性质稳定，耐热及有机溶剂的作用，与抗原或抗体偶联后，活性很少受损失。
1．感受态的制备
（1）辣根过氧化物酶，偶联级接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。
（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。
（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。
（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。
（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。
2．重组DNA的转化
（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：
（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。
（3）42℃90s。
（4）37℃水浴5min。
（5）辣根过氧化物酶，偶联级加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。
（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。
辣根过氧化物酶，偶联级载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体，辣根过氧化物酶，偶联级在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
R6827-02Plant RNA Kit(200)
植物RNA中量提取试剂盒：从小于500mg新鲜或冷藏的植物组织中提取500ug总RNA
R6628-01Plant RNA Midi Kit(10)
R6628-02Plant RNA Midi Kit(25)
植物RNA大量提取试剂盒：从小于5g新鲜或冷藏的植物组织中提取高达2mg总RNA
R6629-01Plant RNA Maxi Kit(5)
R6629-02Plant RNA Maxi Kit(20)
真菌RNA小量提取试剂盒：从小于100mg真菌组织或真菌细胞中提取总RNA
R6840-00Fungal RNA Kit(5)
R6840-01Fungal RNA Kit(50)
R6840-02Fungal RNA Kit(200)
RNA保护液：保护组织或细胞在12个月内中总RNA不发生降解
R0424-01RNAsafer Stabilizer Reagent(50ml)
更新时间：2024/3/23 17:27:28
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