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人NK细胞

人NK细胞

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原产地:中国大陆发布时间:2016/9/6 16:14:33

人NK细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

采购度:280

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详细内容

 NK细胞传代培养

细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代,再培养,传代培养也是一种将细胞保存下去的方法,同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程,悬浮型细胞直接分瓶就可以而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。

NK细胞建立和培养简介:

创建的4因子转录法进行细胞制作,原料为末梢血单核细胞,采样简单。如使用新鲜单核细胞,2周后可获得细胞克隆体(图1),4周内便可以制作出初代细胞(图2)。在培养方面,使用无滋养层培养法对细胞进行增殖培养,可在每周获得2-3倍的细胞(图3,图4)。在细胞状态稳定后,进行免疫染色测试,对细胞的未分化状态进行确定,分别对细胞进行膜染色(图5)及核染色(图6),由此得到高质量的细胞。                        

NK细胞主要服务:

1)细胞基础培养(有滋养层or无滋养层)

2)细胞增殖及冷冻保存

3)基础培养技术实习

4)新药及实验仪器上市前评估

NK细胞培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?

                                          因:

黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基

1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;

2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能

  a、是黑胶虫,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。黑胶虫可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随NK细胞传代而传代。黑胶虫与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的黑胶虫,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。

 b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。

 c、是核糖体,也可能是杂质

 CEM/C1RPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人急性淋巴细胞白血病细胞

T84D-MEM/F-12培养基+5%胎牛血清人结肠腺癌肺转移细胞

NCI-H716 [H716]RPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人结直肠腺癌细胞

RWPE-1K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF人正常前列腺上皮细胞

WPMY-1DMEM培养基+5%胎牛血清人正常前列腺基质永生化细胞

22RV1RPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人前列腺癌细胞

DU 145F-12培养基+10%胎牛血清人前列腺癌细胞

LNCaP clone FGCRPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人前列腺癌细胞

PC-3F-12培养基+10%胎牛血清人前列腺癌细胞

HeLaDMEM+10% FBS人宫颈癌细胞

MDA-MB-415L-15培养基+15%胎牛血清人乳腺腺癌细胞

MDA-MB-436L-15培养基+10%胎牛血清人乳腺腺癌细胞

HeLa 229RPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人宫颈癌细胞

SiHaMEM培养基(GIBCO)+10%胎牛血清人子宫颈鳞癌细胞

C-33 AMEM培养基(GIBCO)+10%胎牛血清人子宫颈癌

MS751MEM培养基(GIBCO)+10%胎牛血清人子宫颈表皮癌细胞

ME-180McCOY's 5A+10%胎牛血清人子宫颈表皮癌细胞

RL95-2D-MEM/F-12培养基+10%胎牛血清人子宫内膜癌细胞

Ca SkiRPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人宫颈癌肠转移细胞

HCC 94 [HCC941122]RPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人子宫鳞癌细胞(高分化)

HEC-1-BMEM培养基(GIBCO)+10%胎牛血清人子宫内膜腺癌细胞

SK-OV-3McCoy'5A+10%胎牛血清人卵巢癌细胞

ES-2McCOY's 5A+10%胎牛血清人卵巢透明细胞癌

HCC1937RPMI-1640(GIBCO)+10%胎牛血清人乳腺癌细胞

JARDMEM培养基+10%胎牛血清人胎盘绒毛癌细胞

WISHMEM培养基(GIBCO)+10%胎牛血清人羊膜细胞

更新时间:2024/3/23 17:26:47

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