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产品分类

可保种型蓝白T载体

价格： 型号：

原产地：中国大陆发布时间：2016/9/19 14:26:02

可保种型蓝白T载体快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ，重复性好，离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

采购度：231

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标签：（可保种型蓝白T载体用途 可保种型蓝白T载体操作说明 可保种型蓝白T载体价格）

详细内容

可保种型蓝白T载体

数量：大量
保质期：两年
保存条件：-20℃保存
规格：50ng
T载体是克隆PCR扩增产物必不可少的工具，但是由于市场上的各种T载体质量参差不齐，用户很难购买到满意的产品；同时购买的T载体为线性DNA，不能保种，必须反复购买，累计成本很高。为解决这一问题，特推出一站式T载体制备试剂套装，它含有除限制性内切酶以外的、制备T载体所需要的所有试剂，包括可以在转化宿主细菌后永久保存的环形T载体质粒DNA。用户可以在方便的时候自己制备高质量的T载体，再也不必因为T载体质量不好而烦恼。1. 一次购买，终身拥有。本产品提供制备T载体用的环形质粒DNA，可以象其他质粒一样保种并长期保存。需要时随时制备，十分方便。2. 一站式自助型。本产品含有转化试剂，质粒DNA制备试剂和胶回收试剂，用户只需要提供XcmI限制性内切酶和基本分子生物学实验条件，就可以自己制备T载体。整个过程只需要两天。3. T载体含T率为100%。本产品不是使用Taq DNA聚合酶或TdT加尾法制备T载体，而是使用XcmI酶切法。质粒的多克隆位点上预先插入了一段位点经过精心设计的片段，用XcmI酶将此1.3 Kb片段切除后将得到两端都是T突出的载体DNA（即T载体），所以含T率远高于用其它方法得到的T载体。4. 方便各种下游操作。用本产品得到的克必隆蓝白T载体插入位点两侧有多种常见的酶切位点，便于后续克隆。5. XcmI位点在a互补区，可以使用蓝白斑筛选重组子；两边还有T7和SP6 RNA聚合酶启动子，便于制备RNA探针。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。可保种型蓝白T载体传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

可保种型蓝白T载体除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，可保种型蓝白T载体比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，可保种型蓝白T载体倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，可保种型蓝白T载体但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

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更新时间：2024/3/28 13:48:32

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