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中性亲和素蛋白

中性亲和素蛋白

价格: 型号:

原产地:中国大陆发布时间:2016/9/23 11:44:22

中性亲和素蛋白快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ,重复性好,离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

采购度:186

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详细内容

 中性亲和素蛋白

 数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 10mg
中性亲和素蛋白是一种去糖基化形成的亲和素,因此对外源凝集素的结合降低至检测不出的水平,而对结合生物素的亲和性(Ka=1015M-1)没有任何损失。中性亲和素蛋白的等电点为中性,这样可以避免非特异的结合。另外它表面的赖氨酸残基让它可以被衍生或进行蛋白蛋白标记。中性亲和素蛋白的分子量为6000,对生物素的特异结合能力大约为14μg/mg蛋白,接近理论活性。它具有如下特点:用于检测组氨酸标签蛋白1、相比抗组氨酸抗体背景更低2、可进行抗体剥离和重新检测3、去糖基化,将外源凝集素结合降低至不可检测水平4、可在组织化学中用于生物素封闭试剂5、结合能力为11-17μg生物素/mg中性生物素蛋白

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。中性亲和素蛋白传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

中性亲和素蛋白除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,中性亲和素蛋白比例也很高,虽然仍存在风险。

1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,中性亲和素蛋白倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。

2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,中性亲和素蛋白但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。

 M2563-02Mag-Bind Poly-Gel DNA Extraction Kit(200)

聚丙烯酰胺凝胶RNA纯化试剂盒:从聚丙烯酰胺胶中回收RN段

R6376-00Poly-Gel RNA Extraction Kit(5)

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RNA纯化相关试剂盒

微量RNA纯化试剂盒:从各种粗制或酶促反应中纯化或浓缩RNA

R6247-00MicroElute RNA Clean Up Kit(5)

R6247-01MicroElute RNA Clean Up Kit(50)

R6247-02MicroElute RNA Clean Up Kit(200)

RNA探针纯化试剂盒:从标记反应中快速回收RNA探针

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M6248-01Mag-Bind RNA Clean Up Kit(50)

更新时间:2024/3/23 17:27:28

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