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产品分类
极高热稳定单链结合蛋白
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 50µg
ET SSB (极高热稳定性单链结合蛋白) 是从极度耐热的微生物中分离得到的单链 DNA 结合蛋白质,在95℃ 温育 60 分钟后,依然具有全部活性。因为具有极高的热稳定性,ET SSB 可用于需要高温反应条件的实验中,如核酸扩增反应和测序反应。 具体有下列特点:1. 提高 DNA 聚合酶的延伸能力2. 稳定和标记 ssDNA 结构3. 增加 PCR 反应的产量和特异性4. 增加 RT-PCR 中,反转录的产量和延 伸能力5. 改善强二级结构区域的 DNA 测序6.通过 ssDNA 结合和链置换,增强 RecA蛋白的活性
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。极高热稳定单链结合蛋白传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现高效分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
极高热稳定单链结合蛋白除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,极高热稳定单链结合蛋白比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,极高热稳定单链结合蛋白倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因高效转化的方法,极高热稳定单链结合蛋白但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
组织DNA抽提
微量DNA提取试剂盒:从各种微量样品中如:干血、头发等样品提取基因组DNA
D3096-00MicroElute Tissue DNA Kit(5)
D3096-01MicroElute Tissue DNA Kit(50)
D3096-02MicroElute Tissue DNA Kit(200)
组织DNA提取试剂盒:从各种动物组织、石蜡包埋组织提取基因组DNA
D3396-00Tissue DNA Kit (5)
D3396-01Tissue DNA Kit (50)
D3396-02Tissue DNA Kit (200)
96孔板组织DNA提取试剂盒:从96个30mg组织样品中纯化10-30ug基因组DNA
D1196-00Tissue DNA Kit(1x95)
D1196-01Tissue DNA Kit(4x96)
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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