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产品分类

AMV逆转录酶

价格： 型号：

原产地：中国大陆发布时间：2016/9/23 11:57:39

AMV逆转录酶快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ，重复性好，离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

采购度：239

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标签：（AMV逆转录酶用途 AMV逆转录酶操作说明 AMV逆转录酶价格）

详细内容

AMV逆转录酶

数量：大量
保质期：一年
保存条件： -20℃保存
规格： 200U
AMV 逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒（AMV），其方法由 Houts 等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157 KD的 αβ 全酶。本酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成，也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV 逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板，具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性，DNA 为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性，*适反应温度在42-55℃，可达60℃，如果使用焦磷酸钠，*适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 Kb cDNA。AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。它具有下列特点：1. 高灵敏度。2. 高得率。 3. 高达60℃的反应温度可有效打开RNA二级结构。 4. 可合成长至 10-12 Kb的cDNA。

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。AMV逆转录酶传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

AMV逆转录酶除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，AMV逆转录酶比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，AMV逆转录酶倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，AMV逆转录酶但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

总RNA提取试剂盒：从1X107个真核细胞，100mg动物/植物组织中提取100ug总RNA

R6934-01Total RNA Kit II(50)

R6934-02Total RNA Kit II(200)

总RNA中/大量提取试剂盒

R6754-00Ultra-Pure TotalRNA Midi Kit（2）

R6754-01 Ultra-Pure TotalRNA Midi Kit（10）

R6754-02Ultra-Pure TotalRNA Midi Kit（25）

R6755-00Ultra-Pure TotalRNA Maxi Kit（2）

R6755-01Ultra-Pure TotalRNA Maxi Kit（5）

★R6755-02Ultra-Pure TotalRNA Maxi Kit（20）

★总DNA/RNA共提取试剂盒

★R6731-00total DNA/RNA Isolation Kit(5)

R6731-01total DNA/RNA Isolation Kit(50)

更新时间：2024/3/23 17:27:28

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