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产品分类

核酸内切酶 III （Nth）

价格： 型号：

原产地：中国大陆发布时间：2016/9/23 13:33:06

核酸内切酶 III （NTH）快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ，重复性好，离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

采购度：176

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详细内容

核酸内切酶 III （NTH）

数量：大量
保质期：一年
保存条件： -20℃保存
规格： 1000U
E. coli 核酸内切酶 III (Nth) 既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性，占E.coli AP酶总活性的90%。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶 (AP) 位点。AP-裂解酶活性则切割 AP 位点的 3＇端，产生一个 5＇磷酸和一个 3＇磷酸-α,β不饱和醛。被核酸内切酶 III 识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6 二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。具体有下列特点：1. 单细胞凝胶电泳 (彗星试验)，彗星试验的推荐稀释倍数1：104〜1：1052. 碱性析出3. 碱解旋

酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。核酸内切酶 III （NTH）传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出，表达量则常常超过大肠杆菌系统，如果实现高效分泌表达，则纯化成本非常低，具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。

核酸内切酶 III （NTH）除了用于规模化生产重组蛋白之外，毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要作用，比如表达蛋白用于结构分析，信号传导途径研究，当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少，一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。

如果需要，完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索，从以往的战绩来看，毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了，核酸内切酶 III （NTH）比例也很高，虽然仍存在风险。

1）原核诱导时间，从你的结果来看，诱导1-5小时变化不大，时间点影响较小，取3小时没有问题。很多情况下，温度对可溶性影响较大，不知道你30度诱导的可溶性如何？如果蛋白主要是可溶性的，那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体，核酸内切酶 III （NTH）倒是可以再降低一下诱导温度。此外，很多蛋白包含体复性后有活性，如果可溶性表达困难或表达量太低，仍可以考虑包含体复性策略。

2）酵母细胞的破壁可以采用机械法，也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨，主要用于中试和生产，但有的仪器也可以兼顾实验室规模，这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体，是一种外源基因高效转化的方法，核酸内切酶 III （NTH）但用于破壁检测表达则成本太高，此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献，是小量裂截用于表达检测的，我没有直接作过，但我们实验室的研究生反映还可以。

质粒相关溶液

PS001Solution I, 250ml

PS002Solution II, 250ml

PS003Solution III, 250ml

PS004Neutralization Buffer, 250ml

PS005Buffer SE, 250ml

PS006Buffer T1, 250ml

PS007Buffer T2, 250ml

PS008Buffer T3, 250ml

PS009Buffer HB, 250ml

PS010DNA Wash Buffer Concentrate, 100 ml

PS011DNA Wash Buffer Concentrate, 500ml

PS012ETR Reagent, 100ml

PS013MGC Binding Buffer Concentrate, 20ml

PS014SPM Wash Buffer Concentrate, 40 ml

PS015Buffer GBT, 100 ml

PS016Endotoxin-Free Elution Buffer-100

更新时间：2024/4/19 10:43:02

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