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产品分类
RECJF 核酸外切酶
数量: 大量
保质期: 半年
保存条件: -20℃保存
规格: 1000U
RecJf 作用于单链 DNA,沿 5' →3' 方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf 与麦芽糖结合蛋白 (MBP) 融合表达。其催化特性与野生型 RecJ 相同。与MBP的融合,增强了 RecJf 的溶解度。当底物为 5' 端突出了 22 个核苷酸的 DNA 时,经RecJf 酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5' 突出末端 (1-5 个核苷酸) 和 5' 凹陷末端 (1-8 个核苷酸) 。RecJf 发挥活性时无需 5'末端磷酸化。具体有下列特点:1 . 特异性 5' →3' 单链 DNA核酸外切酶2. 从 DNA 上切下单磷酸脱氧核苷酸
1.感受态的制备
(1)RECJF 核酸外切酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)RECJF 核酸外切酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
RECJF 核酸外切酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,RECJF 核酸外切酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
ZI241-1羊抗马IgG0.5mlZOMANBIO
ZI242-1驴抗羊IgG0.5mlZOMANBIO
荧光素标记抗体
ZI301-1羊抗人IgG-FITC(绿色)(抗全分子)0.5mlZOMANBIO
ZI301-2羊抗人IgG-FITC(绿色)(抗全分子)1mlZOMANBIO
ZI301-3羊抗人IgG-FITC(绿色)(抗全分子)5mlZOMANBIO
ZI302-1羊抗人IgG-RBITC(红色)0.5mlZOMANBIO
ZI302-2羊抗人IgG-RBITC(红色)1mlZOMANBIO
ZI302-3羊抗人IgG-RBITC(红色)5mlZOMANBIO
ZI303-1羊抗人IgM-FITC(μ链特异)0.5mlZOMANBIO
ZI303-2羊抗人IgM-FITC(μ链特异)1mlZOMANBIO
ZI304-1羊抗人IgM-RBITC(μ链特异)0.5mlZOMANBIO
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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