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产品分类
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 1000U
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶 APE1(Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I),也称为 HAP 1 或 Ref-1,与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5' 端的磷酸二酯键,产生单链 DNA 断裂,留下3' 羟基和 5' 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外,据报道 APE1 还具有弱的 DNA 3' 二酯酶、3' 到 5' 外切酶和 RNase H 活性。除 DNA 修复活性外,APE 1 还能通过一种氧化还原机制,体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。作为这个功能的一部分,APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun 同源二聚体、Hela 细胞AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb 和 ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。具体有下列特点:1. 单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:103 。2. 碱洗脱3. 碱解旋4. 改良切刻翻译
1.感受态的制备
(1)人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶激酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
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ZI312-1羊抗人白蛋白-RBITC0.5mlZOMANBIO
ZI312-2羊抗人白蛋白-RBITC1mlZOMANBIO
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ZI316-3羊抗兔(全分子)-RBITC5mlZOMANBIO
ZI317-1羊抗小鼠IgG(全分子)-FITC0.5mlZOMANBIO
ZI317-2羊抗小鼠IgG(全分子)-FITC1mlZOMANBIO
ZI317-3羊抗小鼠IgG(全分子)-FITC5mlZOMANBIO
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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