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产品分类
核糖核酸酶HII
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 250U
核糖核酸酶 HII (RNase HII) 为核糖核酸内切酶,适用于在双链 DNA 内部切刻核糖核酸的 5' 末端,产生 5' 磷酸和 3' 羟基末端。RNase HII 还可以在冈崎片段的 RNA 部分进行多处切割。本产品具体有下列特点:1. 重组酶2. 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A)3. 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA4. 无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。
1.感受态的制备
(1)核糖核酸酶HII接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)核糖核酸酶HII加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
核糖核酸酶HII载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,核糖核酸酶HII在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
ZI415-1羊抗猪IgG(1:500-2000)0.1mlZOMANBIO
ZI415-2羊抗猪IgG(1:500-2000)0.5mlZOMANBIO
ZI416-1羊抗牛IgG0.1mlZOMANBIO
ZI416-2羊抗牛IgG0.5mlZOMANBIO
ZI417-1羊抗马IgG0.1mlZOMANBIO
ZI417-2羊抗马IgG0.5mlZOMANBIO
ZI418-1羊抗鸡IgG0.1mlZOMANBIO
ZI418-2羊抗鸡IgG0.5mlZOMANBIO
ZI419-1兔抗牛IgG0.1mlZOMANBIO
ZI419-2兔抗牛IgG0.5mlZOMANBIO
ZI420-1兔抗鸡IgG0.1mlZOMANBIO
ZI420-2兔抗鸡IgG0.5mlZOMANBIO
ZI421-1兔抗马IgG0.1mlZOMANBIO
ZI421-2兔抗马IgG0.5mlZOMANBIO
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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