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产品分类

T4 RNA 连接酶 2（截短型）

价格： 型号：

原产地：中国大陆发布时间：2016/9/26 13:37:29

T4 RNA 连接酶 2（截短型）快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ，重复性好，离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。

采购度：240

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详细内容

T4 RNA 连接酶 2（截短型）

数量：大量
保质期：一年
保存条件： -20℃保存
规格： 2000U
T4 RNA 连接酶2（截短型），又称T4 RNL2截短型，可特异性地将DNA 或 RNA 的预腺苷酰化 5´末端连接到 RNA 3´末端。该酶连接时不需要 ATP ，但需要预腺苷酰化底物。该酶的表达来自 E. coli质粒，该质粒编码T4 RNA连接酶 2 基因的前249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2不同，T4 RNL2截短型不能将底物的 5´末端腺苷酰化，因此无法将RNA 或DNA的 5´ 磷酸末端连接到 RNA 3´ 端。该酶，可用于microRNA克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷酰化的引物，因此，可以降低连接背景。1. 将 5＇预腺苷化的 DNA 或 RNA 连接到任何 RNA 3＇末端2. 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 克隆文库构建3. 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建4. 无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。

1．感受态的制备

（1）T4 RNA 连接酶 2（截短型）接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。

（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。

（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。

（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重组DNA的转化

（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：

（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）T4 RNA 连接酶 2（截短型）加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。

（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。

基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。

T4 RNA 连接酶 2（截短型）载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。

转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。

感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。

转导:指以噬菌体为载体，T4 RNA 连接酶 2（截短型）在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。

转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

ZS605-120×SSC溶液250mlZOMANBIO

ZS605-220×SSC溶液500mlZOMANBIO

ZS606-150×Denhardt＇s液50mlZOMANBIO

ZS606-250×Denhardt＇s液100mlZOMANBIO

ZS607-1去离子甲酰胺100mlZOMANBIO

ZS607-2去离子甲酰胺200mlZOMANBIO

其他常规试剂

ZS7011M Tris-HCl,pH6.8100mlZOMANBIO

ZS7021M Tris-HCl,pH7.4100mlZOMANBIO

ZS7031M Tris-HCl,pH7.6100mlZOMANBIO

ZS7041M Tris-HCl,pH8.0100mlZOMANBIO

更新时间：2024/3/23 17:27:28

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