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产品分类
TAQ DNA 连接酶(TAQ DNA LIGASE)
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 1000U
Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶 DNA 链上的两条契合寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性。它具体有下列特点:1. 耐热性好2. 可在 PCR 和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸3. 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测4. 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变
1.感受态的制备
(1)TAQ DNA 连接酶(TAQ DNA LIGASE)接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)TAQ DNA 连接酶(TAQ DNA LIGASE)加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
TAQ DNA 连接酶(TAQ DNA LIGASE)载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,TAQ DNA 连接酶(TAQ DNA LIGASE)在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
D6945-01Plasmid Mini Kit II(50)
D6945-02Plasmid Mini Kit II(200)
质粒中量提取试剂盒:从25-50ml细菌培养液中纯化200-250ug高纯度的质粒DNA
D6904-01Plasmid Midi Kit(10)
D6904-03Plasmid Midi Kit(25)
D6904-04Plasmid Midi Kit(100)
质粒大量提取试剂盒:从200-250ml细菌培养液中提取1.5mg质粒DNA
D6922-00Plasmid Maxi Kit(2)
D6922-01Plasmid Maxi Kit(5)
D6922-02Plasmid Maxi Kit(20)
酵母质粒提取试剂盒:从5ml酵母培养基中提取1ug的质粒DNA
D3376-00Yeast Plasmid Kit (5)-V Spin Column
D3376-01Yeast Plasmid Kit (50)-V Spin Column
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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