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产品分类
甲酰胺嘧啶 [FAPY]-DNA 糖基化酶
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 500U
Fpg (甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶) 也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶(OGG),既有 N -端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基,产生一个脱嘌呤 (AP) 位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3' 或 5' 端,因此可以除去 AP 位点,产生一个具有 3' 和 5' 磷酸的碱基缺口。被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括:7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤 (8-氧代鸟嘌呤) 、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。具体有下列特点:1. 单细胞凝胶电泳 (彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数,1:103~1:1042. 碱性析出3. 碱解旋4. 修饰的切刻平移技术
1.感受态的制备
(1)甲酰胺嘧啶 [FAPY]-DNA 糖基化酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)甲酰胺嘧啶 [FAPY]-DNA 糖基化酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
甲酰胺嘧啶 [FAPY]-DNA 糖基化酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,甲酰胺嘧啶 [FAPY]-DNA 糖基化酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
D1192-01E-Z 96 Blood DNA Kit(4 x 96)
D1192-02E-Z 96 Blood DNA Kit(20 x 96)
全血DNA中/大量提取试剂盒:
D3494-01Blood DNA Midi Kit(10)
D3494-03Blood DNA Midi Kit(50)
D3494-04Blood DNA Midi Kit(100)
D2492-01Blood DNA Maxi Kit(5)
D2492-02Blood DNA Maxi Kit(20)
D2492-03Blood DNA Maxi Kit(50)
病毒DNA提取试剂盒
D3892-00Viral DNA Kit(5)
D3892-01Viral DNA Kit(50)
D3892-02Viral DNA Kit(200)
SQ血液DNA提取试剂盒: (溶液型抽提方式)
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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