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产品分类
T7 DNA 聚合酶(未修饰)
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 300U
T7 DNA 聚合酶催化在感染过程中 T7 噬菌体 DNA 的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性:DNA 聚合酶活性和较强的 3' →5' 外切核酸酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链 DNA 模板的复制。具体有下列特点:1. 缺口填充 (无链置换活性)2. 定点突变中第二链的合成
1.感受态的制备
(1)T7 DNA 聚合酶(未修饰)接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)T7 DNA 聚合酶(未修饰)加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
T7 DNA 聚合酶(未修饰)载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,T7 DNA 聚合酶(未修饰)在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
D3485-02Plant DNA Kit(200)
96孔板植物DNA提取试剂盒:从30mg植物组织中纯化基因组DNA用于PCR操作
D1086-01E-Z 96 Plant DNA Kit(1x96)
D1086-02E-Z 96 Plant DNA Kit(4x96)
植物DNA中量提取试剂盒:从小于新鲜(500mg干燥)/干燥(150mg)植物组织中提取基因组DNA
D3487-00Plant DNA Midi Kit(2)
D3487-01Plant DNA Midi Kit(10)
D3487-02Plant DNA Midi Kit(25)
植物DNA大量提取试剂盒:从1g植物组织提取基因组DNA
D3488-01Plant DNA Maxi Kit(5)
D3488-02Plant DNA Maxi Kit(20)
SP植物DNA小量提取试剂盒:从100mg植物组织中提取高分子量基因组DNA
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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