联系人：徐云云
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产品分类
价格： 型号：
原产地：中国大陆发布时间：2016/9/26 13:56:54
采购度：247
T4 DNA 聚合酶
数量： 大量
保质期： 一年
保存条件： -20℃保存
规格： 50U
在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3′-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3′→5′核酸外切酶活性，该活性比Klenow Fragment强100～1,000倍，也作用于双链DNA，在dNTP存在条件下表现出聚合酶活性，当dNTP用尽时转为3′→5′核酸外切酶的活性。本酶不含 5′→3′的核酸外切酶活性。 此产品特点是： 利用较强的 3′→5′的核酸外切酶活性，通过置换合成（Replacement synthesis）从 DN段的 3’末端进行标记。DNA末端的平滑化。通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点。
1．感受态的制备
（1）T4 DNA 聚合酶接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。
（2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。
（3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。
（4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。
（5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。
2．重组DNA的转化
（1）将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记：
（2）冰浴30min至1h。中间摇动3次，以防受体菌沉底。
（3）42℃90s。
（4）37℃水浴5min。
（5）T4 DNA 聚合酶加入无相应抗生素的Lb 200μl，混匀后，37℃水浴30～60min。
（6）分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布，室温下干燥，然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。
T4 DNA 聚合酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体，T4 DNA 聚合酶在细菌之间转移DNA 的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
D5511-00SP Plant DNA Kit(5)
D5511-01SP Plant DNA Kit(50)
D5511-02SP Plant DNA Kit(200)
SP植物DNA中量提取试剂盒：从500mg植物样品快速提取基因组DNA
D5528-00SP Plant DNA Midi Kit(2)
D5528-01SP Plant DNA Midi Kit(10)
D5528-02SP Plant DNA Midi Kit(25)
SP植物DNA大量提取试剂盒：从2g新鲜/300mg干燥植物组织提取基因组DNA
D5538-00SP Plant DNA Maxi Kit(2)
D5538-01SP Plant DNA Maxi Kit(5)
D5538-02SP Plant DNA Maxi Kit(20)
HP植物DNA小量提取试剂盒：从100mg新鲜或30mg干燥植物组织提取基因组DNA
D2485-00HP Plant DNA Kit(5)
D2485-01HP Plant DNA Kit(50)
更新时间：2024/3/23 17:27:28
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