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产品分类
TFL DNA聚合酶
数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 100U
Tfl DNA Polymerase (Tfl DNA 聚合酶) 是从黄色栖热菌(Thermus flavus ) 中提取的热稳定性酶,分子量大约为94kDa。这种酶可在74℃复制 DNA,在95℃的半衰期为40 分钟。Tfl DNA 聚合酶在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿5` → 3` 方向发生聚合反应,形成双链DNA;也可在镁离子存在条件下以RNA 为模板沿5` → 3`方向合成DNA。该酶具有5` → 3` 外切酶活力。当使用Tfl DNA 聚合酶进行PCR 反应和引物延伸反应时,推荐在较高温度条件下进行。本产品随酶提供的10× 反应缓冲液中不含有Mg2+。单独提供足量的25mM MgSO4 溶液以便于在不同条件下优化酶反应。
1.感受态的制备
(1)TFL DNA聚合酶接种单菌落于2ml LB培养液中,37℃过夜。
(2)取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中,37℃振摇4~6h至A590=0.4~0.6。
(3)倒入50ml管内,水浴10min,以2500~3000rpm离心5min,弃上清。
(4)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体,冰浴20min,同上离心弃上清。
(5)缓慢加入75mmol/L预冷CaCl21.0ml轻轻混匀后分装在1.5ml Eppendorf管中,每管200μl,冰浴1~2h。
2.重组DNA的转化
(1)将3只Eppendorf管按下列转化项目作好标记:
(2)冰浴30min至1h。中间摇动3次,以防受体菌沉底。
(3)42℃90s。
(4)37℃水浴5min。
(5)TFL DNA聚合酶加入无相应抗生素的Lb 200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。
(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。
基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
TFL DNA聚合酶载体:能在连接酶的作用下和外源DNA 片段连接并运送DNA 分子进入受体细胞的DNA 分子。
转化:指质粒DNA 或以它为载体构建的重组DNA 导入细菌的过程。
感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA 分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。
转导:指以噬菌体为载体,TFL DNA聚合酶在细菌之间转移DNA 的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA 的过程。
转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
M1027-01Mag-Bind Plant DNA Kit(2x96)
M1027-02Mag-Bind Plant DNA Kit(8x96)
真菌DNA抽提试剂盒
真菌DNA小量提取试剂盒:从100mg真菌组织或细胞中提取基因组DNA
D3390-00Fungal DNA Kit(5)
D3390-01Fungal DNA Kit(50)
D3390-02Fungal DNA Kit(200)
D1090-01E-Z 96 Fungal DNA Kit(2x96)
D1090-02E-Z 96 Fungal DNA Kit(8x96)
真菌DNA中量提取试剂盒:从500mg新鲜真菌组织或150mg干燥真菌组织提取基因组DNA
D3590-01Fungal DNA Midi Kit(10)
D3590-02Fungal DNA Midi Kit(25)
真菌DNA大量提取试剂盒:从1g真菌组织样品中提取基因组DNA
更新时间:2024/3/23 17:27:28
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